样品来源1,2-二氯乙烷污染土样采自某化工厂。培养基无机盐培养(g/L):NH4C11.34,NaCl1.00,KZHPOQ1.00KHZPOQ0.50MgS047H200.20LB培养基(g/L)酵母浸粉5.0，蛋白陈10.0,氯化钠10.0，调节pH至中性。LB固体培养基另加人2%的琼脂粉。菌株的富集、筛选与鉴定在100mL无机盐培养基中加人5g污染土壤样品，培养3d(180r/min,300C)，使微生物富集。取10mL富集液加人90mL的无机盐培养基(含20mg/L1,2-二氯乙烷)中，期间每天补充20mg/L1,2-二氯乙烷至富集液OD6o。约为0.1后，继续转接培养，每次转接按梯度不断提高1,2-二氯乙烷质量浓度直至200mg/L，富集驯化1个月，取5%富集液验证1,2-二氯乙烷降解效果，对200mg/L1,2-二氯乙烷的24h降解率大于70%即可用于涂布筛菌。将菌群富集液分别稀释10-Z,10-a和10-"倍，将其涂布于含200mg/L1,2-二氯乙烷的LB固体培养基上，置于30℃培养箱中培养3-5d，对不同形态的单菌落进行挑菌纯化。验证纯化后的菌株对1,2-二氯乙烷的降解能力，选取最佳的1株命名为YNS将菌株三区划线于LB固体培养基上，观察其菌落形态，并使用扫描电镜观察菌株的显微结构，参照《伯杰氏细菌鉴定学手册》测定菌株部分生理生化指标。使用细菌通用引物(27F:5'-AGAGTTT-GATCCTGGCTCAG-3'，14928:5'-GGTTACCTTGT-TACGACTT-3')对YNS的基因组进行16SrRNA扩增，由苏州金唯智生物科技有限公司完成测序工作。将拼接后的序列文件在NCBI数据库中进行比对，并使用ClustalW对所有序列进行多重比对(参数采用默认值)。基于16SrRNA序列数据，使用MEGA11软件通过Neighbor-Joining方法构建菌株YNS的系统发育树。http://www.anhuanchem.com