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<1,2-二氯乙烷污染土壤的好氧生物修复>
  

  本文从某化工厂的1,2-二氯乙烷污染土壤中筛选出一株具有高效1,2-二氯乙烷降解能力的菌株Ancylobactersp.YNS,考察培养条件(pH、温度和NaCl质量浓度等)对菌株YNS生长及1,2-二氯乙烷降解的影响,并进一步探究了环境因素(环境温度、土壤污染物质量分数和土壤含水率)对菌株YNS修复污染土壤效果的影响,并通过土壤酶活水平的变化评估修复效果。研究结果丰富了1,2-二氯乙烷好氧降解菌株的种质资源库,并为1,2-二氯乙烷污染土壤的好氧生物修复奠定了关键的理论基础。1,2-二氯乙烷污染土样采自某化工厂。品,培养3d(180r/min,30℃),使微生物富集。取10mL富集液加人90mL的无机盐培养基(含20mg/L1,2-二氯乙烷)中,期间每天补充20mg/L1,2-二氯乙烷至富集液OD6o。约为0.1后,继续转接培养,每次转接按梯度不断提高1,2-二氯乙烷质量浓度直至200mg/L,富集驯化1个月,取5%富集液验证1,2-二氯乙烷降解效果,对200mg/L1,2-二氯乙烷的24h降解率大于70%即可用于涂布筛菌。将菌群富集液分别稀释10-Z,10-a和10-"倍将其涂布于含有200mg/L1,2-二氯乙烷的LB固体培养基上,置于30℃培养箱中培养3-5d,对不同形态的单菌落进行挑菌纯化。验证纯化后的菌株对1,2-二氯乙烷的降解能力,选取最佳的1株命名为YNS将菌株三区划线于LB固体培养基上,观察其菌落形态,并使用扫描电镜观察菌株的显微结构,参照《伯杰氏细菌鉴定学手册》测定菌株部分生理生化指标。使用细菌通用引物(27F:5-AGAGTTT-GATCCTGGCTCAG-3,14928:5-GGTTACCTTGT-TACGACTT-3')对YNS的基因组进行16SrRNA扩增,由完成测序工作。将拼接后的序列文件在NCBI数据库中进行比对,并使用ClustalW对所有序列进行多重比对(参数采用默认值)。基于16SrRNA序列数据,使用MEGA11软件通过Neighbor-Joining方法构建菌株YNS的系统发育树。http://www.anhuanchem.com

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